81說明Fe、Zn、Cu、Mg的原子吸收光譜特征?
原子吸收分光光度法是基于從光源輻射出具有待測元素特征譜線的單色光,通過試樣蒸氣時被蒸氣中待測元素基態(tài)原子所吸收,由輻射譜線被減弱的程度來測定試樣中待測元素含量的方法。該方法的技術(shù)關(guān)鍵是采用由被測元素作陰極的空心陰極燈作光源,光源燈發(fā)出含有被測元素共振線的線光譜通過原子化器時,其中的共振線被待測元素所吸收,吸收的多少與待測元素的含量有關(guān)。
Fe、Zn、Cu、Mg等元素強烈的特征性吸收譜線是:
Fe:248.3nm
Zn:213.8nm(空氣—乙炔火焰)
Cu:324.5nm
Mg:285.2nm(空氣—乙炔火焰)
82何謂血漿功能酶?舉例加以說明。
血漿功能酶是指在血漿中有確定的和特異生理生化功能的一類酶,它們不僅在血漿中發(fā)揮催化作用,而且酶在血漿中的濃度也明顯高于其它組織。血漿功能酶包括:
。1)大多數(shù)凝血因子和纖溶酶原:如凝血酶原(第Ⅱ因子)、前激肽釋放酶、纖維蛋白溶酶原等。
(2)參與血漿脂蛋白代謝的兩種酶:脂蛋白脂肪酶(LPL)和卵磷脂膽固醇;D(zhuǎn)移酶(LCAT)。
。3)銅藍蛋白(亦稱亞鐵氧化酶)。
。4)腎素(即血管緊張肽原酶):腎素是由腎小球旁器的顆粒細胞合成并釋放進入血液的一種蛋白水解酶,催化血管緊張素原轉(zhuǎn)變成血管緊張素Ⅰ。
。5)血漿膽堿脂酶,等。
83何謂酶的催化活性濃度?酶的活性單位如何表示?
。1)酶的催化活性濃度是酶含量測定的一種表示方法。它是利用酶的催化特性,通過測定被加速的反應速度來間接的算出酶含量的高低,此法的結(jié)果不能用質(zhì)量單位,只能用反應速度單位(μmol·min-1)來表示酶量的多少,并計算出一定體積(L)標本中酶的含量(活性單位數(shù))。這種表示酶濃度的確切名稱是酶的催化活性濃度,簡稱為酶活性濃度。
(2)酶活性單位有:①國際單位(在特定條件下每min催化1μmol底物轉(zhuǎn)化的酶量);②催量(katal,簡稱Kat):它的定義是在最適條件下每s催化1mol底物轉(zhuǎn)化的酶量。Kat對血清酶活性測定而言顯得過大,故用μkatal或nkatal.兩者可換算
1IU=1μmol·min-1=16.67nmol·s-1=16.67nkatal
84解釋連續(xù)監(jiān)測法。說明本法為什么要在線性反應期進行測定?
。1)連續(xù)監(jiān)測法是指在適當?shù)膬x器上,在不終止酶反應的條件下,多點監(jiān)測整個酶促反應過程中某一反應引起的產(chǎn)物或底物隨時間變化的情況,在反應速度恒定期間,以單位時間酶反應初速度計算酶的活性濃度。由于本方法測定的是反應速率,故又名“速率法”;又由于測定是在酶促反應動態(tài)期進行的,故又稱“動力學法”(也曾稱為“動態(tài)法”)。但IFCC文件建議避免將本法稱為“動態(tài)法”,而應稱為“連續(xù)監(jiān)測法”。我國衛(wèi)生部臨床檢驗中心亦推薦使用“連續(xù)監(jiān)測法”。
。2)酶促反應的線性反應期是指在最佳條件下,酶促反應速度保持恒定(零級反應期)的時間內(nèi)進行的反應。此時反應產(chǎn)物的生成量與反應時間呈正比例,單位時間內(nèi)吸光度的變化值亦與酶活性成正比例。這樣就能保證測定結(jié)果較為準確可靠。
85解釋非結(jié)合膽紅素(Bu)、結(jié)合膽紅素(Bc)和δ膽紅素(Bδ)?
。1)非結(jié)合膽紅素(Bu)是指游離膽紅素,是血紅素的代謝產(chǎn)物,分子式為C33H36N4O,分子量584.7,金黃色,不溶于水,易溶于有機溶劑,不與重氮試劑直接顯色,是正常血清中的主要膽色素。
。2)結(jié)合膽紅素(Bc):在一分子非結(jié)合型膽紅素的兩個丙酸基側(cè)鏈上結(jié)合二個葡萄糖醛酸殘基即構(gòu)成膽紅素葡萄糖醛酸二酯,稱為結(jié)合膽紅素(Bc)。它是在肝細胞內(nèi)合成的,是膽汁中的主要膽紅素。水溶性,能與重氮試劑直接顯色,無毒性。
。3)δ—膽紅素(Bδ):在長期高膽紅素血癥病人血漿中存在δ—膽紅素。Bδ有兩種形式:一種是脂型的Bδ,是一個丙酸基側(cè)鏈以共價鍵與Alb結(jié)合,另一個丙酸基側(cè)鏈結(jié)合著糖醛酸;未酯化型Bδ只有一個丙酸基與Alb結(jié)合。85%的Bδ能與重氮試劑直接顯色。Bδ既不被肝細胞攝取。也不能被腎小球濾過,致使它在循環(huán)血液中有較長的停留時間。
86何謂腎清除率和內(nèi)生肌酐清除率?說明其判斷指標。
。1)腎清除率是指單位時間內(nèi)(min)經(jīng)腎小球濾出的血漿濾液量(ml/min)。
。2)內(nèi)生肌酐清除率(ccr)是指單位時間(min)內(nèi),腎臟清除血漿內(nèi)生肌酐的血漿體積,其結(jié)果以ml/min表示。
。3)內(nèi)生肌酐清除率試驗是判斷腎小球濾過功能的敏感指標,其判斷指標主要有:
、賲⒖贾担耗105±20ml/min
女95±20ml/min
②初步估計腎小球濾過功能損害的程度:
若Ccr70——51ml/min輕度損害
50——31ml/min中度損害
<30ml/min重度損害
慢性腎功能衰竭的病人:
若Ccr20——11ml/min為早期腎功能衰竭
10——6ml/min為晚期腎功能衰竭
<5ml/min為終末期腎功能衰竭
、壑笇е委煟篊cr<30ml/min限制蛋白質(zhì)攝入
<30ml/min噻嗪類利尿藥治療無效
く10ml/min應結(jié)合臨床進行透析治療
87解釋Jaffe反應及“假肌酐”兩個名詞,并說明如何消除“假肌酐”對Jaffe反應的干擾?
。1)Jaffe反應是指血漿中的肌酐與堿性苦味酸鹽反應,生成黃紅色的苦味酸肌酐復合物的反應。
。2)Jaffe反應特異性不高,標本中的維生素C、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸、甲基多巴、高濃度的葡萄糖、蛋白質(zhì)和一些抗菌素如青霉素G、頭孢噻吩、頭孢西丁、頭孢唑啉等也都能與堿性苦味酸生成紅色復合物。這些不是肌酐但能起顯色反應的物質(zhì)稱為“假肌酐”。
。3)消除“假肌酐”干擾,主要采取兩種辦法:
、儆梦絼ü杷徜X或純化漂白土)吸附或用離子交換樹脂除去“假肌酐”。
、谠谒俾史y定中,設置20S延遲期,即在樣品與堿性苦味酸試劑混勻后的20—80S之間(此時期中肌肝與苦味酸反應占主導地位,稱為“窗口期”進行測定,可得到較準確的測定結(jié)果。
88試述ApoAI、ApoB100和ApoCⅡ的合成部位及其主要功能?
。1)ApoAI由肝細胞合成,是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,其功能是激活LCAT(卵磷脂膽固醇;D(zhuǎn)移酶),在膽固醇的逆向運轉(zhuǎn)中起重要作用。
。2)ApoB100由肝臟合成,是LDL.VLDL的結(jié)構(gòu)蛋白(肝臟合成的每一個VLDL顆粒中只含1分子apoB100,LDL由VLDL轉(zhuǎn)變,每個LDL顆粒中只含1分子apoB100),也是LDL受體的配體。
。3)ApoCⅡ主要來源于肝臟。其主要功能是激活脂蛋白脂酶(LPL),啟動LPL對乳糜微粒和VLDL中甘油三脂的水解反應。
89何謂基質(zhì)效應?試述它對血脂測定結(jié)果準確性的影響。
。1)“基質(zhì)”是指標本中除分析物以外的一切組份。對血清膽固醇測定而言,就是指膽固醇以外血清中的一切成份及其物理化學性質(zhì)。
。2)“基質(zhì)效應”是指:①標本中除分析物以外的其它成分對分析物測定值的影響;②基質(zhì)對分析方法準確測定分析物能力的干擾。廣義說來,基質(zhì)效應也應包括已知的干擾物(如膽固醇測定中的膽紅素、血紅蛋白、抗壞血酸等都是干擾物),但目前只將基質(zhì)效應限于生物材料中未知或未定性的物質(zhì)或因素(如粘度、pH等)的影響。基質(zhì)效應所致分析結(jié)果的偏差稱為基質(zhì)偏差(matrixbias)。
。3)基質(zhì)效應對血脂測定結(jié)果準確性的影響:以總膽固醇測定為例,1979年由Cooper證實,在膽固醇酶法測定中,由于校準液與病人血清的反應性不同,可使總膽固醇的測定值偏低5%~7%.80年代也有不少報告指出校準液中的膽固醇用酶法測定回收率偏低。在甘油三脂、HDL-C及LDL-C酶法測定中也出現(xiàn)了不同程度的基質(zhì)效應。因此采用定值人血清做校準物來克服基質(zhì)效應對血脂分析結(jié)果準確性的影響是十分重要的。
90說明2.3-DPG對Hb與O2結(jié)合的影響?
2.3-DPG是2.3-二磷酸甘油酸的縮寫,它是紅細胞糖酵解支路的產(chǎn)物。在成熟紅細胞內(nèi),2.3-DPG的含量在動脈血中為3400μmol/L,靜脈血中為4940μmol/L,比糖酵解中間產(chǎn)物(如3—磷酸甘油酸等)高出數(shù)百倍。研究確定2.3-DPG在紅細胞內(nèi)有重要生理功能,即能降低Hb和O2的親和力,促使HbO2釋放O2以適應組織對氧的需求。
2.3-DPG在近中性pH環(huán)境中與Hb(脫氧血紅蛋白)以等分子(1:1)結(jié)合,結(jié)合常數(shù)為105mol-1;但是它與HbO2(氧合血紅蛋白)的結(jié)合常數(shù)相比只有前者的1/100,可見2.3-DPG主要與脫氧Hb結(jié)合。當它與HbO2的二條β鏈形成鹽鍵結(jié)合后,使Hb變成T型(緊密型),降低了Hb與O2的親和力,從而促進HbO2解離釋放O2.這種作用在PO2較高的肺部影響較小,但血液流經(jīng)組織時,紅細胞內(nèi)存在的2.3-DPG就發(fā)揮作用,使HbO2大量分解釋放出O2、供組織利用。