三萜類化合物色譜分離法是中藥士/初級中藥師/主管中藥師考試大綱考點內(nèi)容,衛(wèi)生資格考試吧整理中藥學資格考試輔導資料、考點內(nèi)容,供廣大中藥學職稱考試考生參考學習:
色譜法是目前分離三萜類化合物最常用的方法,通常采用多種色譜法相組合的方法。
、傥街V法;②分配柱色譜法;③高效液相色譜法;④大孔樹脂柱色譜;⑤凝膠色譜法。
(1)吸附柱色譜法:
、俪S梅椒ǎ捎糜诜蛛x各類三萜化合物。
②依據(jù)所用的吸附劑性質(zhì)的不同,分為正相吸附柱色譜和反相吸附柱色譜。
、壅辔街V的吸附劑常用硅膠。
、芊聪嘀V通常以鍵合相硅膠Rp-18、Rp-8或Rp-2等為填充劑。
。2)分配柱色譜法:多用于分離皂苷,常用硅膠等作為支持劑,固定相為3%草酸水溶液等,流動相為含水的混合有機溶劑:如氯仿-甲醇-水,正丁醇-水等。
。3)高效液相色譜法:是目前分離皂苷類化合物最常用的方法,分離效能較高。用于皂苷的分離制備一般采用反相色譜柱,以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)為洗脫劑。
(4)大孔樹脂柱色譜:適用于皂苷的精制和初步分離。
操作:將含有皂苷的水溶液通過大孔樹脂柱后,先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì),然后再用濃度由低到高的甲醇或乙醇依次進行梯度洗脫,極性大的皂苷可被l0%~30%的醇洗脫下來,極性小的皂苷則被50%以上的醇洗脫下來。
。5)凝膠色譜法:分子篩的原理來分離分子量不同的化合物,在用不同濃度的甲醇、乙醇或水等溶劑洗脫時,各成分按分子量遞減順序依次被洗脫下來。即分子量大的皂苷先被洗脫下來,分子量小的皂苷后被洗脫下來。應用較多的是在有機相中使用的Sephadex LH-20.