151.在酶聯(lián)免疫吸附試驗中會出現(xiàn)前滯現(xiàn)象（阻滯現(xiàn)象）嗎？
酶聯(lián)免疫吸附試驗的基本原理和步驟為：
1）抗原或抗體結(jié)合到固相載體的表面并保持其反應(yīng)能力。
�。�2）抗原或抗體與酶相結(jié)合并保持其反應(yīng)能力及酶活性。
（3）結(jié)合物與相應(yīng)的酶聯(lián)抗原或抗體反應(yīng)，再加入相應(yīng)的底物。這時被結(jié)合到結(jié)合物上的酶可以催化底物水解、氧化或還原，產(chǎn)生有色的物質(zhì)。顏色的深淺與相應(yīng)的抗原抗體量成正比，因此可以用來定量抗原或抗體。
因此，這類反應(yīng)與試管沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)不同。由于反應(yīng)物中抗原或抗體被固定在固相載體上，而且要把沒固定的洗掉，反應(yīng)后還要把過剩的沒參加反應(yīng)的抗體或抗原再洗掉，所以反應(yīng)僅僅停留在第1階段上，沒有試管液相反應(yīng)的第2階段。因此，在酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)中不會出現(xiàn)試管凝集或沉淀反應(yīng)中抗原或抗體過剩所引起的阻滯現(xiàn)象。
同樣道理，固相放射免疫技術(shù)也不會出現(xiàn)阻滯現(xiàn)象。
包被對抗原或抗體用量過大，效果不好，這是空間障礙造成的。
152、加溫為什么能促進抗原抗體反應(yīng)？
抗原抗體借助擴散穿越介質(zhì)分子，彼此互相碰撞而發(fā)生反應(yīng)。加溫能促進擴散和碰撞，所以能促進抗原抗體反應(yīng)。但有的抗原抗體反應(yīng)在較低溫度下就很強烈。比如，冷溶血素和冷凝集素，在4℃左有反應(yīng)很好。冷溶血素在4℃下結(jié)合到紅細胞上，然后加溫到37℃左右開始溶血。一般抗原抗體反應(yīng)都是在37℃°C左右進行的，當加溫到56～6℃時，抗原抗體復(fù)合物將要解離。
153、何謂抗原、免疫原？二者關(guān)系是什么？
對這個問題做出明確回答的材料很少�？蛇@兩個概念在日常工作和學(xué)術(shù)活動中又經(jīng)常應(yīng)用。現(xiàn)接著有關(guān)文獻作些介紹，以供參考。
在精典免疫學(xué)里，抗原是指進入機體能引起抗體產(chǎn)生，并且能和其抗體發(fā)生特異反應(yīng)的物質(zhì)。但據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)的觀點，這個定義就不充分了。因為隨著非感染免疫學(xué)的發(fā)展，又出現(xiàn)了另一些類型的免疫反應(yīng)。這些類型的免疫反應(yīng)并不產(chǎn)生抗體，或者說抗體的作用不是主要的。比如延緩型過敏反應(yīng)，移殖和耐受現(xiàn)象都屬于這1類。在這些情況下，抗原對機體的作用是引起對抗原敏感的淋巴細胞的出現(xiàn)或者降低淋巴細胞對抗原的反應(yīng)性。
考慮到上述這些新情況，目前的抗原定義為：進入機體能引起特異的免疫反應(yīng)的物質(zhì)就是抗原。免疫反應(yīng)包括：產(chǎn)生抗體，出現(xiàn)致敏的淋巴細胞或者耐受狀態(tài)。與精典免疫學(xué)中抗原的定義相比這個定義要廣得多。
用于免疫并能誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生的物質(zhì)就是免疫原。
從上述抗原和免疫原的定義出發(fā)，可以看出它們的關(guān)系是，抗原的含義要比免疫原廠，而且免疫原主要強調(diào)用于免疫。抗原包括免疫原和耐受驚。
154、抗體、沉淀素、凝集素，溶血素，免疫球蛋白的關(guān)系如同？
抗體是指與抗原能發(fā)生特異反應(yīng)的物質(zhì)的總稱。
免疫球蛋白是指與抗體活性有關(guān)的血清中的蛋白質(zhì)，屬于γ球蛋白。
沉淀素為引起沉淀反應(yīng)的抗體。
凝集素為引起凝集反應(yīng)的抗體。
溶血素為引起溶血反應(yīng)的抗體。
這些概念并不是孤立的，截然不同的，而是彼此聯(lián)系，彼此相通的。
如果要問抗體究竟是什么東西？即抗體的化學(xué)本質(zhì)是什么？答案就是：抗體的化學(xué)本質(zhì)是兔疫球蛋白，但免疫球蛋白不一定都表現(xiàn)出抗體活性，更不都是某廣特異性的抗體。
對于抗體可以從不同的角度進行分類。從來源分類，可有同種抗體和異種抗體。從反應(yīng)的能力上來分，可以有完全抗體和不完全抗體。從反應(yīng)的形式上來分，就有沉淀素、凝集素和溶血素等。它們并不是完全不同的物質(zhì)，比如lgG可表現(xiàn)為沉淀素，但也可以表現(xiàn)為溶血素，也不是不能凝集顆粒抗原，只不過它的凝集活性較lgM低罷了。它所以表現(xiàn)出不同反應(yīng)形式，這主要是因為抗原以及反應(yīng)條件不同。
155、何為抗原抗體有效結(jié)合價？
抗原抗體的結(jié)合價一般來講是變化的。當抗體過剩時，它能表現(xiàn)為最低結(jié)合價，即1價，最高結(jié)合價也不會超過決定基數(shù)或抗體結(jié)合部位數(shù)。有效結(jié)合價是指在某一反應(yīng)中，在特定的抗原抗體濃度比以及其它條件下，抗原（或抗體）實際參與結(jié)合的決定基數(shù)（或結(jié)合部位數(shù)）。以lgM為例，它可以呈1價，也可以呈10價，所以lgM是變價的，其結(jié)合價變化范圍是1～10.但是，當它和l個具體的抗原以特定的濃度比相混合時，將呈現(xiàn)一定的結(jié)合價，比如5價。對于抗原也是一樣。
156．抗原抗體反應(yīng)中，第一階段為什么進行得很快；而反應(yīng)第二階段為什么很慢？
對于抗原抗體反應(yīng)歷程，傳統(tǒng)的看法是分成兩個階段：第1階段是抗原抗體反應(yīng)歷程，傳統(tǒng)的看法是分成2個階段：第1階段是抗原抗體反應(yīng)形成簡單的復(fù)合物；第2階段是這些簡單復(fù)合物之間的再結(jié)合，出現(xiàn)沉淀或凝集。
實驗表明，反應(yīng)的第l階段幾乎是瞬間完成的，在幾ms到幾lOms，最遲在幾min內(nèi)完成。而第2階段反應(yīng)要慢得多。甚至要nd才能完成。
這有2個方面的原因：第1，參與第1階段反應(yīng)的是游離的抗原或抗體，與抗原抗體復(fù)合物比較起來，它們要小得多，擴散速度要快得多，因此碰撞機會也就很多。第2，從第1反應(yīng)階段所形成的小復(fù)合物到產(chǎn)生肉眼可見的沉淀物或凝集物，要經(jīng)過多次地反復(fù)地碰撞結(jié)合。而且復(fù)合物越來越大，擴散速度越來越小，碰撞結(jié)合的機會就越來越少，所以反應(yīng)很慢。
157.何謂間接直接熒光抗體染色法？
間接法分兩個步驟，第1步周未標識的抗體與標本的抗原作用，沖洗后，第2步用示記熒光色素的特異的抗球蛋白熒光抗體染色，如第1步有特異的抗原抗體結(jié)合，則第：步由于標本中有抗體球蛋白存在。染色時可破熒光標識的抗球蛋白抗體染色，例如在標仁片中有脊髓灰質(zhì)炎病毒感染的細胞，第1步先用兔抗脊髓灰質(zhì)病毒免疫血清作用，沖先后再以羊抗兔免疫球蛋白熒光抗體染色，即可梁上特異熒光。
此法可以1種熒光抗體（抗球蛋白熒光抗體）用于多種抗原抗體系統(tǒng)，比較方便。出于第1步結(jié)合的中間抗體分子，可以分別結(jié)合多個抗球蛋白熒光抗體分子，因此敏感性主往較直接法為高，但間接法涉及的成份較多，引起非特異性熒光機會較多，必須做一系列對照。
直接法是利用熒光色素標識的特異性抗體直接檢查未知抗原，此法優(yōu)點是特異性高、簡單、快速、但必須標記對各種不同抗原的相應(yīng)熒光抗體，手續(xù)復(fù)雜，敏感性較間接法乳
158、何謂熒光補體法？
與間接法相似，其不同點是在用免疫血清處理時，加上新鮮啄鼠血清作為補體，使標本的抗原形成抗原-抗體-補體復(fù)合物，第二步用抗琢鼠補體C3的熒光抗體染色，鑒定未知抗原或未知抗體。此法敏感性很高，但由于更容易出現(xiàn)非特異性熒光染色，且補體洼質(zhì)不穩(wěn)定，每次均需新鮮抽取，故在實際應(yīng)用上，此法尚未推廣。
159、何請間接法一一酶標記抗球蛋白測定抗體法？
將抗原吸附或結(jié)合在固相載體上（常用聚苯乙稀等塑料小管小盤或小珠等作為固相載體，，然后加入含有特異抗體的血清，經(jīng)孵育一定時間后，固相體表面抗原與抗體形成夏合物，洗滌除去其它成份，再加入酶標記的抗球蛋白抗體，它與固相載體上的免疫復(fù)合物結(jié)合。經(jīng)洗滌除去多余的酶標記抗體，加入底物，在酶的催化作用下底物發(fā)生反應(yīng)（降解或氧化還原，產(chǎn)生有色物，通過分光光度計可測出產(chǎn)物的量，即可測知被結(jié)合在固相載體表面的酶-抗球蛋白的量，進而可知存在于血清中的抗體的量。
160、何謂佐劑，其作用原理及優(yōu)缺點如阿？
佐劑又稱免疫增加劑，它與抗原合用能增高抗原的免疫原性和改變宿主的免疫反應(yīng)也達到增加細胞免疫力或提高抗體產(chǎn)量。
原理：佐劑能增強免疫力的機理，主要是引起遲發(fā)型過敏反應(yīng)，招引大量巨噬細胞對抗原加工處理和促進免疫反應(yīng)，同時又可使抗原儲存，緩慢釋放和改變抗原性基團的構(gòu)形。以及促進機體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的激素調(diào)節(jié)作用，其中主要靠蠟質(zhì)D成分及其它表面活性物質(zhì)，大致分為下列2類作用。
（1）對抗原的作用。方式是抗原（半抗原）加佐劑作用——增強免疫原性。
�。�2）對宿主的作用。方式是抗原（半抗原），加佐劑加宿主機體——免疫應(yīng)答反應(yīng)增強。
優(yōu)缺點
�。�1）優(yōu)點：①佐劑能增強抗原的免疫效能，并能將無抗原性的物質(zhì)（簡單半抗原）轉(zhuǎn)變成有效的抗原。②佐劑能增高循環(huán)中抗體的產(chǎn)量和提高細胞免疫力，并能延長免疫的有效期間。③佐劑能改變產(chǎn)生循環(huán)抗體的類型，例如單純注射卵自蛋白只產(chǎn)生IgG型抗體，加福氏完全佐劑-同注射則可產(chǎn)生出lgM型抗體。
�。�2）缺點：①注射佐劑后引起局部硬結(jié)、腫塊、持續(xù)較長時間不消退。如注射福氏完全佐劑，除引起局部肉芽腫外，往往會造成持久的潰瘍，以致嚴重損傷組織。②佐劑能引起實驗性自身免疫病，有時能誘發(fā)腫瘤。
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