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微生物與寄生蟲檢驗:沙門菌的檢查方法及鑒定

時間:2011-12-12 09:51來源:臨床醫(yī)學檢驗技術(shù)考試 作者:lengke 點擊:
  

  1.分離培養(yǎng)

 。1)糞便:一般將糞便或肛拭直接接種于SS和麥康凱平板上,用兩種培養(yǎng)基的目的是為提高標本的陽性檢出率。

  (2)血液和骨髓:抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進行增菌,48h將培養(yǎng)物移種到血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基上,若有細菌生長取菌涂片革蘭染色并報告結(jié)果。對增菌培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)7天,仍無細菌生長時,則報告陰性。

 。3)尿液:取尿液2~3ml經(jīng)硫磺酸鹽肉湯增菌后,再接種于腸道菌選擇培養(yǎng)基或血平板上進行分離培養(yǎng),亦可將尿液離心沉淀物分離培養(yǎng)。

  (4)局部感染的膿液。

  2.鑒定:沙門菌屬的鑒定與志賀菌屬相同,須根據(jù)生化反應(yīng)和血清學鑒定兩方面進行。

  1)初步鑒定:如為革蘭陰性桿菌時作氧化酶試驗,陰性時,挑取可疑菌落分別移種于KIA和MIU上。并作生化反應(yīng)。以沙門菌多價診斷血清作玻片凝集試驗。

  凡符合KIA:K/A、產(chǎn)氣+/-、H2S+/-、MIU:動力+、吲哚-、脲酶+,氧化酶-,觸酶+,硝酸鹽還原+,以沙門菌多價血清作玻片凝集試驗陽性,鑒定為沙門菌屬。

  2)最后鑒定:沙門菌血清學鑒定主要借助于沙門菌O抗原多價血清與O、H、Vi抗原的單價因子血清。甲型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌和傷寒沙門菌分別屬于A、B、D血清群。

  3.血清學診斷:肥達試驗:用已知的傷寒沙門菌0、H抗原,甲乙丙副傷寒沙門菌H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗,以檢測患者血清中抗體的含量,來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥并判別沙門菌的種類。

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