91何謂Bohr效應(yīng)？說(shuō)明其發(fā)生的機(jī)理及生理意義。
�。�1）Bohr效應(yīng)：血液pH對(duì)Hb與O2親和力的影響稱為Bohr效應(yīng)。
�。�2）Bohr效應(yīng)的發(fā)生機(jī)制與pH改變引起Hb構(gòu)象改變有關(guān)。即當(dāng)H+濃度增加或PCO2增加時(shí)，可促進(jìn)Hb的a鏈氨基端纈氨酸的氨基和a鏈122、β鏈146組氨酸殘基的異咪唑基與H+結(jié)合，使其帶正電荷，從而促進(jìn)鹽鍵的形成，使Hb變成T型（緊密型）結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致Hb對(duì)O2的親和力降低。反之，鹽鍵斷裂，Hb變成R型（松弛型），增大了Hb對(duì)O2的親和力。
�。�3）Bohr效應(yīng)具有重要生理意義：當(dāng)血液流經(jīng)肺部時(shí)，CO2從血液向肺泡擴(kuò)散，血液PCO2下降，[H+]也降低，均使Hb對(duì)O2的親和力增加，氧離曲線左移，在任一PO2下Hb氧飽和度增加，血液運(yùn)氧量加大；當(dāng)血液流經(jīng)組織時(shí)，CO2從組織進(jìn)入血液，血液PCO2和[H+]升高，Hb對(duì)O2親和力降低，曲線右移，促進(jìn)HbO2解離向組織釋放更多的O2.
92什么是Porter—Silber反應(yīng)和Zimmermann反應(yīng)？說(shuō)明它們的用途？
�。�1）Porter和Silber的比色法是測(cè)定尿17羥類(lèi)固醇（17-OHCS）的常用方法。用提取劑提取酸性尿（pH2.4～2.6）中的17-OHCS，在提取相中加入Porter-Silber試劑，在60℃水浴中保溫30min.完成Porter-Silber氏顏色反應(yīng)。此反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是17-OHCS與鹽酸苯肼的硫酸溶液作用，生成一種能產(chǎn)生黃色腙的21-醛），通過(guò)與同樣處理標(biāo)準(zhǔn)比色，計(jì)算出尿液中17-OHCS的含量。
（2）Zimmermann反應(yīng)是測(cè)定尿中17-酮類(lèi)固醇（17-KS）的方法學(xué)基礎(chǔ)。尿中17-KS結(jié)合物在酸性（pH2.0）環(huán)境中，經(jīng)加熱水解，用乙醚提取水解后游離的17-KS，洗滌后使17-KS與堿性間二硝基苯反應(yīng)，生成特征性紫色反應(yīng)，即Zimmermann反應(yīng)。
93什么是OCV和RCV？說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行OCV和RCV的工作條件？
�。�1）OCV是“最佳條件下的變異”的英文縮寫(xiě)。它表示本室在目前條件下該檢驗(yàn)項(xiàng)目所能達(dá)到的最好的精密度水平。各種不同方法中OCV的測(cè)定必須遵循一條基本原則，即OCV的測(cè)定應(yīng)使用與常規(guī)工作相同的檢驗(yàn)方法、試劑和儀器。但對(duì)儀器必須重新進(jìn)行校正；試劑應(yīng)新鮮配制并進(jìn)行標(biāo)定；由技術(shù)熟練的工作人員操作；在全部測(cè)定過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制溫度、光照、反應(yīng)時(shí)間等一切可能影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素，并正確的計(jì)算檢驗(yàn)結(jié)果。
（2）RCV是“常規(guī)條件下的變異”的英文縮寫(xiě)。它表示本室目前條件下，常規(guī)工作中該檢驗(yàn)項(xiàng)目的精密度水平。做RCV的基本要求是把質(zhì)控樣品完全當(dāng)病人標(biāo)本，每天由作常規(guī)檢驗(yàn)的操作者隨同病人樣品同批測(cè)定，而不要有任何特殊照顧，以便能真實(shí)反映常規(guī)檢驗(yàn)的精密度。
94什么是任選式全自動(dòng)生化分析儀？在生化自動(dòng)分析工作中采取哪些抗交叉污染的措施？
（1）任選式全自動(dòng)生化分析儀具有在一個(gè)通道中任意選擇測(cè)定多種項(xiàng)目（一般可高達(dá)60項(xiàng)以上）。所謂任選有兩種方式。其一是輸入樣品的順序，測(cè)定完一個(gè)樣品的所有項(xiàng)目后再做下一個(gè)樣品。另一種方式是按做批量測(cè)定的方式，將輸入的所有樣品按欲測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行組合分類(lèi)。相同的項(xiàng)目一起測(cè)定，測(cè)完一種項(xiàng)目再測(cè)另外一種項(xiàng)目。
�。�2）全自動(dòng)生化分析儀在工作中防止交叉污染的主要措施有：
�、偌訕犹结槨⒃噭┨结樀淖詣�(dòng)清洗與沖洗功能；
�、诒壬蟮淖詣�(dòng)沖洗功能；
�、圩詣�(dòng)光掃描比色皿，剔除不合格的比色皿；
�、苡�(jì)算機(jī)自動(dòng)降低具有相似測(cè)定方法的測(cè)定項(xiàng)目間的交叉污染概率。
95解釋真值、誤差、精密度和準(zhǔn)確度？
�。�1）真值：標(biāo)本中被測(cè)物的真實(shí)濃度稱為真值。
�。�2）誤差：誤差是實(shí)驗(yàn)誤差的簡(jiǎn)稱，是某量值的給出值與其客觀真值之差。
（3）精密度：精密度是表征測(cè)定結(jié)果中隨機(jī)誤差大小程度的指標(biāo)，即同一標(biāo)本在一定條件下多次重復(fù)測(cè)定所得到的一系列單次測(cè)定值的符合程度叫做精密度。
�。�4）準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度是指測(cè)定結(jié)果與真值接近的程度。準(zhǔn)確度主要受測(cè)定系統(tǒng)中系統(tǒng)誤差的支配（系統(tǒng)誤差越小準(zhǔn)確度越高），也受隨機(jī)誤差的影響。所以準(zhǔn)確度是表示測(cè)定結(jié)果中系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差的綜合。
96如何區(qū)分一個(gè)分析方法的特異性差和受干擾物質(zhì)的干擾？舉例加以說(shuō)明。
（1）某些非分析物與試劑發(fā)生反應(yīng)，影響了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，說(shuō)明該方法特異性差。例如在用溴甲酚綠法測(cè)定血清白蛋白（Alb）時(shí)，BCG除了與Alb發(fā)生“快反應(yīng)”外，還與血清中的a1酸性糖蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、觸珠蛋白、C反應(yīng)蛋白和銅藍(lán)蛋白等進(jìn)行所謂的“慢反應(yīng)”，使該法Alb測(cè)定值偏高，表明BCG方法用于血清白蛋白測(cè)定時(shí)其特異性差。
（2）所謂干擾是指某些非分析物改變了被測(cè)定物和試劑間的反應(yīng)，從旁影響了分析物被該方法檢測(cè)的正確度。例如在GOD—PAP法測(cè)定葡萄糖的試驗(yàn)中，維生素C、尿酸等還原性物質(zhì)也能使H2O2還原，導(dǎo)致血糖測(cè)定結(jié)果偏低。
97解釋PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR？
（1）PCR是聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerasechainreaction）的英文縮寫(xiě)，是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種在體外特異擴(kuò)增某一目的DNA片段的技術(shù)。
�。�2）DNA—PCR：以DNA為模板，擴(kuò)增特定核苷酸序列。主要用于檢測(cè)特定基因或DNA片段的存在，并常與核酸分子雜交結(jié)合，分析檢定基因突變。
�。�3）RT—PCR：用提取的mRNA或總RNA（含有mRNA）為模板，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增cDNA.是檢測(cè)特定基因表達(dá)水平的主要方法之一，也是用于鑒別、診斷RNA病毒的重要技術(shù)。
�。�4）原位PCR：與原位雜交一樣，原位PCR也無(wú)需提取DNA/RNA，直接用組織切片和細(xì)胞進(jìn)行PCR或RT—PCR.它既能鑒定含有靶DNA/RNA序列的細(xì)胞，又能確定靶DNA/RNA序列在細(xì)胞內(nèi)或染色體上的位置。
�。�5）定量PCR：PCR產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳分離轉(zhuǎn)移膜上，與放射性核素或化學(xué)發(fā)光標(biāo)記的核酸探針雜交。根據(jù)放射自顯影或化學(xué)發(fā)光后底板爆光的強(qiáng)弱，用密度計(jì)掃描定量。此法在基因診斷中應(yīng)用甚廣。
98簡(jiǎn)述膽固醇在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化途徑。
（1）轉(zhuǎn)變?yōu)槟懰岷兔撗跄懰幔?/p>
�。�2）合成膽固醇脂；
（3）在腸道內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榧S固醇隨糞便排出體外；
�。�4）合成皮質(zhì)類(lèi)固醇和性激素；
（5）轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D.
99試列舉五種主要在肝臟進(jìn)行的代謝。
�。�1）可利用糖原提供血糖；
�。�2）進(jìn)行糖異生；
�。�3）在脂類(lèi)代謝過(guò)程中生成酮體；
�。�4）尿素的生成；
�。�5）進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化作用。
100試述α1-微球蛋白（α1-m）、β2-微球蛋白（β2-m）的生化特點(diǎn)及其測(cè)定對(duì)早期腎損傷的診斷價(jià)值？
（1）α1-m：α1-m是一種糖蛋白（含糖量為20%），分子量較�。�3KD），pI4.5~5.0.α1-m由肝臟產(chǎn)生。血液中的α1-m有游離型和與IgA結(jié)合型兩種存在形式，其游離型可通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)，絕大部分在腎小管重吸收降解，故在各類(lèi)腎病引起的腎小球?yàn)V過(guò)功能降低時(shí)，血清α1-m濃度升高。此時(shí)血清α1-m濃度與血清肌酐、血尿和β2-m等呈正相關(guān)（r=0.7以上）。
（2）β2-m：β2-m存在于除紅細(xì)胞和胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞以外所有有核細(xì)胞，尤其在單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中含量豐富，在免疫應(yīng)答中起重要作用。β2-m分子量約為11.8KD，由100個(gè)氨基酸組成的單鏈多肽，pI5.70.它可被腎小球?yàn)V過(guò)，腎小球的濾過(guò)系數(shù)達(dá)0.90，又可被近端腎小管全部重吸收降解。血中β2-m的半衰期為1.8h.血中β2-m濃度主要受腎小球?yàn)V過(guò)功能的影響。故血清β2-m能早期判斷腎小球?yàn)V過(guò)功能，較測(cè)定血清肌酐更靈敏。腎移植成功后血清
β2-m很快下降，當(dāng)發(fā)生排斥反應(yīng)時(shí)，由于腎濾過(guò)率下降，并且因排斥引起淋巴細(xì)胞增多（β2-m合成增多），血清β2-m常增高。
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